CRISPR-Cas9 Protein

Cas9蛋白全称是CRISPR-associated Protein 9,是成簇规则间隔短回文重复序列(CRISPR)系统的一部分,为一种依赖于RNA介导的核酸内切酶。CRISPR/Cas9系统广泛存在于原核生物基因中,是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。在这些生物体中,来自噬菌体的外源遗传物质被整合入CRISPR位点。这些序列特异的片段被转录成短CRISPR-derived RNA(crRNA),crRNA通过碱基配对与tracrRNA(trans-activating RNA)结合形成双链RNA,然后racrRNA/crRNA复合体指导Cas9蛋白切割双链DNA。
在利用CRISPR/Cas9系统进行基因组编辑的过程中,tracrRNA和crRNA可以融合成为1条RNA(sgRNA)。Cas9切割外源DNA需要紧邻原始间隔区下游的5'-NGG-3'原始间隔区相邻基序(PAM)序列的存在。应用此工具,可非常方便快捷地进行任意基因的编辑改造,如基因敲除、敲入、定点突变等。CRISPR/Cas9可用于包括哺乳动物细胞在内的各种系统的基因工程中。
CRISPR/Cas9介导的基因编辑原理(Uddin F et al, 2020
恺佧生物(Kactus Biosystems)隆重推出GMP级Cas9蛋白!
产品特点
GMP厂房生产、药典标准放行检测
体内外双重验证,确保蛋白高活性
良好的批间稳定性和一致性
国内最高标准的CGT蛋白酶GMP生产车间
MES数字化生产管理体系
高于进口GMP产品标准的无菌检测和稳定性研究
符合细胞和基因治疗申报要求,可提供申报用文件
质量要求
项目 检测标准 可接受标准
外观 目视检测 包装完整,溶液澄清,无沉淀或杂质
浓度 非干扰型蛋白质定量 浓度9.5 ~ 12.5 mg/ml
纯度 Bis-Tris检测 不低于95%
RP-HPLC检测 不低于95%
SEC-HPLC检测 不低于95%
内毒素 显色法 不高于10 EU/mg
活性检测 体外切割效率 >85%
DNA酶残留 Qubit检测荧光信号 不高于LOD
RNA酶残留 Qubit检测荧光信号 不高于LOD
宿主蛋白残留 ELISA定量 不高于100 ng/ml
宿主DNA残留 qPCR检测荧光信号 不高于200 ng/ml
无菌检查 薄膜过滤法 未检出
支原体 qPCR定量 未检出
产品应用
基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体 CRISPR基因敲除或敲入
细胞与基因治疗领域的基因敲除与敲入
sgRNA剪切靶点DNA效率检测,降低体内筛选成本
体外剪切靶DNA的特异位点
产品数据

01

产品纯度

Kactus

通过SDS-PAGE以及HPLC实验验证,Cas9蛋白纯度均>95%。

02

产品活性

Kactus

Kactus Cas9体外DNA底物切割活性实验结果表明,其效率和其他品牌产品相当。
Kactus Cas9以RNP形式电转293T细胞系以敲除目的基因。如图所示Kactus Cas9在细胞水平的基因敲除效率与其他品牌Cas9相当。
产品列表
名称 种属 表达体系
CRISPR-Cas9 Protein S.pyogenes E.coli 立即询价
CRISPR-Cas9 Protein (GMP grade) S.pyogenes E.coli 立即询价
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